Γονίδιο αντίστασης καρβαπενέμης (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Ονομασία προϊόντος
HWTS-OT045 Κιτ ανίχνευσης γονιδίου αντίστασης καρβαπενέμης (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (Fluorescence PCR)
Επιδημιολογία
Τα αντιβιοτικά καρβαπενέμης είναι άτυπα αντιβιοτικά β-λακτάμης με το ευρύτερο αντιβακτηριακό φάσμα και την ισχυρότερη αντιβακτηριακή δράση.Λόγω της σταθερότητάς του στη β-λακταμάση και της χαμηλής τοξικότητάς του, έχει γίνει ένα από τα πιο σημαντικά αντιβακτηριακά φάρμακα για τη θεραπεία σοβαρών βακτηριακών λοιμώξεων.Οι καρβαπενέμες είναι εξαιρετικά σταθερές στις β-λακταμάσες εκτεταμένου φάσματος που προκαλούνται από πλασμίδια (ESBLs), στα χρωμοσώματα και στις κεφαλοσπορινάσες που προκαλούνται από πλασμίδια (ένζυμα AmpC).
Κανάλι
| PCR-Mix 1 | PCR-Mix 2 | |
| FAM | ΔΙΑΒΟΛΑΚΙ | ΔΥΝΑΜΗ |
| VIC/HEX | Εσωτερικός έλεγχος | Εσωτερικός έλεγχος |
| CY5 | NDM | KPC |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Τεχνικές παράμετροι
| Αποθήκευση | ≤-18℃ |
| Διάρκεια ζωής | 12 μήνες |
| Τύπος δείγματος | Πτύελα, καθαρές αποικίες, ορθικό επίχρισμα |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0% |
| LoD | 103CFU/mL |
| Ιδιαιτερότητα | α) Το κιτ ανιχνεύει τις τυποποιημένες αρνητικές αναφορές της εταιρείας και τα αποτελέσματα πληρούν τις απαιτήσεις των αντίστοιχων αναφορών. β) Τα αποτελέσματα της δοκιμής διασταυρούμενης αντιδραστικότητας δείχνουν ότι αυτό το κιτ δεν έχει διασταυρούμενη αντίδραση με άλλα παθογόνα του αναπνευστικού, όπως τα Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcleytobacaellaus, Klebsiella pneumoniae, τερ junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, αναπνευστικός αδενοϊός, Enterococcus ή δείγματα που περιέχουν άλλα ανθεκτικά στα φάρμακα γονίδια CTXME, mecA. γ) Κατά των παρεμβολών: Mucin, Minocycline, Gentamicin, Clindamycin, Imipenem, Cefoperazone, Meropenem, Ciprofloxacin Hydrochloride, Levofloxacin, Clavulanic acid, Roxithromycin επιλέγονται για δοκιμή παρεμβολής και τα αποτελέσματα δείχνουν ότι οι προαναφερθείσες παρεμβαλλόμενες ουσίες δεν έχουν για την ανίχνευση γονιδίων αντοχής στην καρβαπενέμη KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM και IMP. |
| Εφαρμοσμένα Όργανα | Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR Systems QuantStudio®5 Συστήματα PCR σε πραγματικό χρόνο Συστήματα PCR πραγματικού χρόνου SLAN-96P (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) Σύστημα PCR σε πραγματικό χρόνο LightCycler®480 Σύστημα ανίχνευσης PCR σε πραγματικό χρόνο LineGene 9600 Plus (FQD-96A,Hangzhouτεχνολογία Bioer) MA-6000 Ποσοτικός Θερμικός Κυκλωτής Πραγματικού Χρόνου (Suzhou Molarray Co., Ltd.) Σύστημα PCR σε πραγματικό χρόνο BioRad CFX96 Σύστημα PCR σε πραγματικό χρόνο BioRad CFX Opus 96 |
Ροή εργασίας
Επιλογή 1.
Συνιστώμενο αντιδραστήριο εκχύλισης: Κιτ γενικής δοκιμής DNA/RNA Macro & Micro-Test (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (το οποίο μπορεί να χρησιμοποιηθεί με Macro & Micro-Test Automatic Nucleic Acid Extractor (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) από την Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Προσθέστε 200μL φυσιολογικού ορού σε το ίζημα του θάλλου.Τα επόμενα βήματα θα πρέπει να ακολουθούν τις οδηγίες για την εκχύλιση και ο συνιστώμενος όγκος έκλουσης είναι100μL.
Επιλογή 2.
Συνιστώμενο αντιδραστήριο εκχύλισης: Αντιδραστήριο εκχύλισης νουκλεϊκού οξέος ή αντιδραστήριο καθαρισμού (YDP302) από την Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. Η εκχύλιση πρέπει να ξεκινήσει αυστηρά σύμφωνα με το βήμα 2 των οδηγιών χρήσης (προσθήκη 200 μL ρυθμιστικού διαλύματος GA στο ίζημα του θάλλου και ανακινήστε μέχρι να αιωρηθεί τελείως ο θάλλος).Χρησιμοποιήστε νερό χωρίς RNase/DNase για έκλουση και ο συνιστώμενος όγκος έκλουσης είναι 100μL.
Επιλογή 3.
Συνιστώμενο αντιδραστήριο εκχύλισης: Αντιδραστήριο απελευθέρωσης δείγματος Macro & Micro-Test.Το δείγμα πτυέλων πρέπει να πλυθεί προσθέτοντας 1 mL φυσιολογικού ορού στο προαναφερθέν κατεργασμένο ίζημα θάλλου, να φυγοκεντρηθεί στα 13000 r/min για 5 λεπτά και το υπερκείμενο απορρίπτεται (διατηρήστε 10-20 μL υπερκειμένου).Για καθαρό στειλεό αποικίας και ορθού, προσθέστε 50 μL αντιδραστηρίου απελευθέρωσης δείγματος απευθείας στο προαναφερθέν κατεργασμένο ίζημα θάλλου και τα επόμενα βήματα θα πρέπει να εξαχθούν σύμφωνα με τις οδηγίες χρήσης.
