Γονίδιο αντοχής στις καρβαπενέμες (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Όνομα προϊόντος
Κιτ ανίχνευσης γονιδίου αντοχής στις καρβαπενέμες HWTS-OT045 (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (PCR φθορισμού)
Επιδημιολογία
Τα αντιβιοτικά καρβαπενέμης είναι άτυπα αντιβιοτικά β-λακτάμης με το ευρύτερο αντιβακτηριακό φάσμα και την ισχυρότερη αντιβακτηριακή δράση. Λόγω της σταθερότητάς τους στις β-λακταμάσες και της χαμηλής τοξικότητάς τους, έχουν γίνει ένα από τα πιο σημαντικά αντιβακτηριακά φάρμακα για τη θεραπεία σοβαρών βακτηριακών λοιμώξεων. Οι καρβαπενέμες είναι ιδιαίτερα σταθερές στις β-λακταμάσες ευρέος φάσματος (ESBLs) που προκαλούνται από πλασμίδια, στα χρωμοσώματα και στις κεφαλοσπορινάσες (ένζυμα AmpC) που προκαλούνται από πλασμίδια.
Κανάλι
| PCR-Mix 1 | PCR-Mix 2 | |
| ΟΙΚΟΓΕΝΕΙΑ | ΔΙΑΒΟΛΑΚΙ | ΔΥΝΑΜΗ |
| VIC/HEX | Εσωτερικός έλεγχος | Εσωτερικός έλεγχος |
| CY5 | NDM | KPC |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Τεχνικές παράμετροι
| Αποθήκευση | ≤-18℃ |
| Διάρκεια ζωής | 12 μήνες |
| Τύπος δείγματος | Πτύελα, καθαρές αποικίες, πρωκτικό επίχρισμα |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0% |
| LoD | 103CFU/mL |
| Ειδικότητα | α) Το κιτ ανιχνεύει τις τυποποιημένες αρνητικές αναφορές της εταιρείας και τα αποτελέσματα πληρούν τις απαιτήσεις των αντίστοιχων αναφορών. β) Τα αποτελέσματα της δοκιμής διασταυρούμενης αντιδραστικότητας δείχνουν ότι αυτό το κιτ δεν έχει διασταυρούμενη αντίδραση με άλλα αναπνευστικά παθογόνα, όπως Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, αναπνευστικό αδενοϊό, Enterococcus ή δείγματα που περιέχουν άλλα γονίδια ανθεκτικά στα φάρμακα CTX, mecA, SME, SHV, TEM, κ.λπ. γ) Αντιπαρεμβατικά: Για τη δοκιμή παρεμβολής επιλέχθηκαν οι ουσίες βλεννίνη, μινοκυκλίνη, γενταμικίνη, κλινδαμυκίνη, ιμιπενέμη, κεφοπεραζόνη, μεροπενέμη, υδροχλωρική σιπροφλοξασίνη, λεβοφλοξασίνη, κλαβουλανικό οξύ, ροξιθρομυκίνη και τα αποτελέσματα δείχνουν ότι οι προαναφερθείσες παρεμβατικές ουσίες δεν έχουν καμία παρεμβατική αντίδραση στην ανίχνευση των γονιδίων αντοχής στις καρβαπενέμες KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM και IMP. |
| Εφαρμοστέα Μέσα | Συστήματα PCR πραγματικού χρόνου Applied Biosystems 7500 Συστήματα PCR πραγματικού χρόνου QuantStudio®5 Συστήματα PCR πραγματικού χρόνου SLAN-96P (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) Σύστημα PCR πραγματικού χρόνου LightCycler®480 Σύστημα ανίχνευσης PCR σε πραγματικό χρόνο LineGene 9600 Plus (FQD-96A,Χανγκζούβιοτεχνολογία) MA-6000 Ποσοτικός Θερμικός Κυκλοποιητής Πραγματικού Χρόνου (Suzhou Molarray Co., Ltd.) Σύστημα PCR πραγματικού χρόνου BioRad CFX96 Σύστημα PCR πραγματικού χρόνου BioRad CFX Opus 96 |
Ροή εργασίας
Επιλογή 1.
Συνιστώμενο αντιδραστήριο εκχύλισης: Macro & Micro-Test General DNA/RNA Kit (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (το οποίο μπορεί να χρησιμοποιηθεί με τον αυτόματο εκχυλιστή νουκλεϊκού οξέος Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) από την Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Προσθέστε 200 μL φυσιολογικού ορού στο ίζημα του θάλλου. Τα επόμενα βήματα θα πρέπει να ακολουθούν τις οδηγίες για την εκχύλιση και ο συνιστώμενος όγκος έκλουσης είναι100 μL.
Επιλογή 2.
Συνιστώμενο αντιδραστήριο εκχύλισης: Αντιδραστήριο εκχύλισης ή καθαρισμού νουκλεϊκών οξέων (YDP302) από την Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. Η εκχύλιση πρέπει να ξεκινήσει σύμφωνα με το βήμα 2 των οδηγιών χρήσης (προσθέστε 200 μL ρυθμιστικού διαλύματος GA στο ίζημα του θαλλού και ανακινήστε μέχρι να εναιωρηθεί πλήρως ο θάλλος). Χρησιμοποιήστε νερό χωρίς RNase/DNase για την έκλουση και ο συνιστώμενος όγκος έκλουσης είναι 100 μL.
Επιλογή 3.
Συνιστώμενο αντιδραστήριο εκχύλισης: Αντιδραστήριο απελευθέρωσης δείγματος Macro & Micro-Test. Το δείγμα πτυέλων πρέπει να πλυθεί με την προσθήκη 1 mL φυσιολογικού ορού στο προαναφερθέν επεξεργασμένο ίζημα του θάλλου, να φυγοκεντρηθεί στις 13000 r/min για 5 λεπτά και το υπερκείμενο υγρό να απορριφθεί (κρατήστε 10-20 µL υπερκείμενου υγρού). Για καθαρή αποικία και ορθικό επίχρισμα, προσθέστε 50 µL αντιδραστηρίου απελευθέρωσης δείγματος απευθείας στο προαναφερθέν επεξεργασμένο ίζημα του θάλλου και τα επόμενα βήματα θα πρέπει να εκχυλιστούν σύμφωνα με τις οδηγίες χρήσης.
